ด้วยพรสวรรค์ด้านการสร้างเสียงหัวเราะของเขา ทำให้นักแสดงหนุ่มคนนี้ได้รับบทบาทนำในภาพยนตร์และซีรีส์แนวคอมเมดี้มากมาย โดยเขาถ่ายทำภาพยนตร์เรื่อง That's My Boy ซึ่งเขาแสดงร่วมกับอดัม แซนด์เลอร์และเลห์ตัน มีสเตอร์
แซมเบิร์กและเพื่อนร่วมกลุ่มนักแสดงตลกLonely Island ของเขา ประสบความสำเร็จอย่างมาก จากการออกอัลบั้มใหม่ของเขา Turtleneck and Chain ซึ่งได้รับการเสนอชื่อในสาขา อัลบั้มเพลงคอมเมดี้ยอดเยี่ยม จาก แกรมมี่ อวอร์ด นอกจากนี้พวกเขายังได้ร่วมงานกับศิลปินชื่อดังมากมาย ไม่ว่าจะเป็น เอค่อน จัสติน ทิมเบอร์เลค, นิคกี้ ไมนาจ และรีฮานน่า ผลงานของพวกเขาได้รับ 3 รางวัลเอมมี่อวอร์ด ในสาขาเนื้อเพลงยอดเยี่ยม จากเพลง I Just Had Sex (ร่วมกับ Akon), Jack Sparrow (feat. Michael Bolton) และ 3-Way (The Golden Rule) (ร่วมกับ Justin Timberlake และ Lady Gaga) และยังขายได้มากกว่า 350,000 ก็อปปี้ ซึ่งนับเป็ยยอดขายอัลบั้มคอมเมดี้ที่สูงที่สุดในปี 2009 และ 2010
ผลงานารแสดงภาพยนตร์ของเขาได้แก่ Friends with Benefits, What's Your Number, I Love You, Man นอกจากนี้ยังได้ร่วมพากย์เสียงในอนิเมชั่น Cloudy with a Chance of Meatballs
